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时间:2025-08-16 19:16:19 来源:网络整理编辑:宠物之家
一、流动相使用前为什么要脱气首先我们了解一下不脱气可能造成的影响:气泡会增加基线的噪音,造成灵敏度下降,甚至无法分析噪声增大,基线不稳,突然跳动)。溶解的氧气还会导致样品中某些组份被氧化,柱中固定相如
首先我们了解一下不脱气可能造成的相使影响:
气泡会增加基线的噪音,造成灵敏度下降,用前甚至无法分析(噪声增大,脱气基线不稳,流动突然跳动)。相使
溶解的用前氧气还会导致样品中某些组份被氧化,柱中固定相(如烷基胺)发生反应,脱气降解而改变柱的流动分离性能。
溶解氧能与某些溶剂(如甲醇、相使四氢呋喃)形成有紫外吸收的用前络合物,此络合物会提高背景吸收(特别是脱气在260nm以下),并导致检测灵敏度的流动轻微降低,会在梯度淋洗时造成基线漂移或形成鬼峰(假峰)。相使
若用FLD(荧光检测器),用前溶解氧在一定条件下还会引起淬灭现象,特别是对芳香烃、脂肪醛、酮等。在某些情况下,荧光响应可降低达95%。
除去其中溶解的气体(如O2),以防止在洗脱过程中当流动相由色谱柱流至检测器时,因压力降低而产生气泡。
排出气泡能减少泵工作的伤害,提高UV检测器的性能高,改善灵敏度。
1、加热回流法:效果较好,但操作复杂,且有毒性挥发污染,同时需要考虑低沸点溶剂挥发造成的组成变化。
2、抽真空脱气法:易抽走有机相。
3、超声脱气法:流动相放在超声波容器中(一般500ml溶液需超声20~30min),此法不影响溶剂组成。超声时应注意避免溶剂瓶与超声槽底部或壁接触,以免玻璃瓶破裂,容器内液面不要高出水面太多。
4、氦气脱气法:在色谱操作前和进行时,将惰性气体喷入溶剂中。严格来说,此方法不能将溶剂脱气,它只是用一种低溶解度的惰性气体(通常是氦)将空气替换出来。主要利用液体中氦气的溶解度比空气低,连续吹氦脱气,效果较好,但成本高。
5、在线真空脱气法:利用在线脱气机在线脱气,智能控制,无需额外操作,成本低,脱气效果明显优于以上几种方法,并适用于多元溶剂体系。
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